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혐기성 배양기의 올바른 사용법

2026-03-14 15:22:55
혐기성 배양기는 혐기성 미생물의 성장 연구를 위해 혐기성 환경을 조성하고 유지하는 전문 밀폐형 실험 장치입니다. 미생물학, 의학, 식품 과학 분야의 연구 및 시험에 널리 사용됩니다.

I. 작동: 혐기성 환경 조성

1. 혼합 질소 및 복합 가스 실린더의 출력 압력 조절: 감압 밸브를 약 0.1 MPa로 조절합니다.

2. 전원 스위치와 온도 조절기를 켜고 원하는 온도로 설정합니다. 배양기 작동실의 온도는 자유롭게 선택하고 조절할 수 있습니다.

3. 사용 목적에 따라 필요한 부속품과 장비를 배치하고, 작동실에 무독성 비닐봉투 두 개를 넣습니다.

4. 건조된 팔라듐 과립 1000g(밀봉)과 제습제 500g, 그리고 혐기성 지시약(밀봉)을 작동실에 넣습니다.

5. 시료실의 내측 및 외측 도어를 단단히 닫고 진공 점검을 실시합니다.

6. 작동실의 2차 질소 주입:

(1) 고무 튜브를 작동실의 공기 흡입구에 삽입하고, 다른 한쪽 끝을 비닐봉투에 넣습니다.

(2) 질소 주입구를 연결하고 질소 조절 밸브를 열어 두 비닐봉투에 질소를 채운 후 입구를 단단히 묶습니다.

(3) 관찰 패널의 플랜지 링에 라텍스 장갑을 착용하고 단단히 조입니다.

(4) 비닐봉투에 있는 질소가 모두 배출될 때까지 작동실로 질소를 천천히 방출합니다.

7. 작동실의 2차 질소 주입: 질소 주입 과정을 반복하고, 배기 밸브를 수시로 열고 닫아줍니다.

8. 작동실 내 3차 혼합 가스 교체:

(혼합 가스 비율: N2 90%, H2 5%, CO2 5%)

(1) 가스 경로를 변경하고, 혼합 가스 주입 밸브를 열고, 주입 중 언제든지 배출 밸브를 열고 닫을 수 있습니다.

(2) 혼합 가스가 비닐 백에 채워진 후, 혼합 가스 직류 밸브(삼방향 밸브)를 닫습니다. (3) 비닐 백에서 작동실로 혼합 가스를 천천히 방출합니다.

(4) 3회 공기 교환 후, 작동실 내 산소 함량이 미량으로 감소합니다.

9. 작동실 내 팔라듐 과립 산소 제거기를 작동시키고 산소 촉매 탈산소 장치에 전원을 연결합니다. 1시간 후, 혐기성 지시 스트립의 색 변화를 관찰합니다. 색 변화가 나타나면 작동실이 혐기성 환경에 도달한 것입니다.

10. 자외선 살균 램프를 켜서 챔버를 살균합니다. 살균 시간은 사용자가 설정합니다.

II. 세균 균주 배치 및 배양

1. 샘플링 챔버의 문을 확인하고 닫습니다.

2. 샘플링 챔버의 외부 문을 열고 세균 균주를 챔버에 넣은 후 외부 문을 닫습니다.

3. 샘플링 챔버에서 질소 퍼징 및 교체 과정을 세 번 수행합니다. 먼저 500 mmHg(66 kPa) 이상의 진공 상태로 만든 후, 질소 밸브를 수동으로 열어 포인터가 0으로 돌아올 때까지 기다린 후 다음 단계로 진행합니다.

4. 진공도가 낮은 경우, 질소 교체 횟수를 늘려야 합니다. 

5. 샘플링 챔버 문을 열고 닫은 후, 점검 및 확인을 위해 100 mmHg(13 kPa)의 저진공 상태를 유지합니다.

6. 혐기성 배양기의 장기 연속 사용 조건:

(1) 수술실의 혐기성 지시 막대를 매일 관찰한다. 정상인 경우 계속 사용할 수 있다. 비정상인 경우 공기를 교체해야 한다.

(2) 첨가된 수소가 미량의 산소와 촉매 흡착 반응을 일으켜 혐기성 상태를 유지할 수 있도록 소량의 혼합 가스를 지속적으로 주입한다. 혼합 가스의 유량은 분당 약 10ml로 한다.

(3) 3일 연속 배양 시마다 제습제를 교체한다.

7. 접종봉 멸균기 사용 방법:

(1) 니켈-크롬 발열선을 단락시켜 붉게 달아오를 때까지 가열한 후 접종봉을 멸균한다.

(2) 접종봉에 왁스 용융점을 직접 올려놓고 시험관 밀봉 왁스 구멍을 돌려 왁스를 녹일 수 있다.